耐藥細(xì)胞株的服務(wù)內(nèi)容包括哪些？

　　耐藥細(xì)胞株一般采用體外低濃度遞增梯度結(jié)合大劑量間歇沖擊的方法，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞對特定藥物產(chǎn)生耐藥性，從而建立相應(yīng)的耐藥細(xì)胞系。細(xì)胞株的服務(wù)內(nèi)容包括哪些？

　　

　　1、在體外，低濃度梯度遞增結(jié)合大劑量間歇沖擊誘導(dǎo)細(xì)胞產(chǎn)生耐藥性。

　　

　　2、藥物對親代細(xì)胞和耐藥細(xì)胞的IC50用2。MTT法，計(jì)算耐藥指數(shù)。

　　

　　目前已知的體外建立耐藥細(xì)胞株的方法有幾種:高劑量藥物沖擊法、提高藥物濃度法、提高藥物濃度與高劑量藥物沖擊相結(jié)合法、轉(zhuǎn)基因藥物篩選法。其中，常用增加藥物濃度法和大劑量藥物沖擊法建立腫瘤細(xì)胞化療耐藥模型。
 

　　

　　1、增加藥物濃度的方法是指用低濃度藥物刺激細(xì)胞，待細(xì)胞適應(yīng)低濃度環(huán)境后，再稍微增加藥物濃度，繼續(xù)等待細(xì)胞適應(yīng)當(dāng)前環(huán)境。經(jīng)過反復(fù)培養(yǎng)和加壓，細(xì)胞終于可以在高濃度藥物環(huán)境中存活。

　　

　　2、大劑量藥物沖擊法是在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)加入超高藥物濃度的藥物，但孵育時(shí)間很短，通常只有幾分鐘。然后，將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到無藥物培養(yǎng)液中緩慢恢復(fù)。最后，通過重復(fù)上述步驟，篩選出高倍數(shù)耐藥細(xì)胞系。

　　

　　兩種方法各有利弊：增加藥物濃度法的優(yōu)點(diǎn)是耐藥細(xì)胞株的藥物劑量是漸進(jìn)的，細(xì)胞培養(yǎng)的外部環(huán)境是逐漸改變的，細(xì)胞更耐受，處于更好的狀態(tài)，但缺點(diǎn)是耐藥誘導(dǎo)的過程需要較長時(shí)間，其化療藥物的作用方式與大劑量、短療程化療的臨床原則不同；大劑量藥物沖擊誘導(dǎo)的優(yōu)點(diǎn)是接近臨床治療大劑量化療藥物沖擊，缺點(diǎn)是大劑量藥物沖擊誘導(dǎo)的藥物濃度很高。由于外界環(huán)境突變，細(xì)胞培養(yǎng)可能難以耐受，細(xì)胞狀態(tài)難以控制，耐藥性不穩(wěn)定。